厌氧培养箱操作使用流程及注意事项

厌氧培养箱操作使用流程及注意事项

‌一、操作使用流程‌

‌准备工作‌

将设备放置在温差小、远离热源且平稳的位置，连接氮气瓶和混合气瓶（N₂ 85%、H₂ 10%、CO₂ 5%），检查气路密封性‌。

清洁箱体内部及手套、托盘等配件，确保无污染；检查钯催化剂是否有效‌。

‌启动与厌氧环境形成‌

接通电源，开启照明灯和温控仪，设置目标温度（通常35–37℃）‌。

‌气体置换流程‌：

‌第一次氮气置换‌：向操作室充入氮气，使手套鼓起后扎紧袋口，重复三次以降低氧含量‌。

‌混合气体置换‌：通入混合气体（N₂/H₂/CO₂），通过流量计控制流量至10ml/min，重复2–3次确保氧浓度极低‌。

启用钯催化剂和除氧装置，1小时后用美兰指示剂检测氧浓度（不变色表示达标）‌。

‌样品操作与培养‌

通过缓冲室传递样品：先抽真空（≥66kPa），再充入氮气或混合气体，重复2–3次以维持无氧状态‌。

穿戴手套操作样品，避免空气进入；培养期间定期监测温度、湿度和氧浓度‌。

‌结束操作‌

通过缓冲室取出样品，清洁箱内残留物，关闭电源及气源‌。

‌二、关键注意事项‌

‌安全与维护‌

‌气路检查‌：定期检测气瓶、管道是否漏气，更换气瓶时扎紧气管防止氧气渗入‌。

‌催化剂维护‌：钯粒需定期更换或再生，确保催化除氧效率‌。

‌密封性验证‌：操作前检查手套、门缝密封条，抽真空后确认压力恢复时间‌。

‌环境控制‌

箱内物品不宜过多，避免阻挡风道影响温度均匀性；长期使用需每日检查氧浓度‌。

灭菌时开启紫外线灯，时间根据实验需求设定‌。

‌设备保养‌

停止使用时，设定40℃以上运行2小时，每半小时开门10分钟以干燥箱体‌。

定期校准温度、氧浓度传感器，清洁冷凝水防止传感器误差‌。

‌安全警示‌

操作含氢气的混合气体时需远离明火，防爆防火‌。

避免放置易燃、腐蚀性物品，确保设备散热空间充足‌。

以上流程及注意事项整合了设备安装、环境控制、样品操作和长期维护的关键步骤，需严格遵循以确保厌氧环境稳定性和实验安全性

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